二手質(zhì)譜指標(biāo)，驗(yàn)收的建議

對(duì)于二手質(zhì)譜指標(biāo)，驗(yàn)收的建議有幾個(gè)是比較重要的：

（1）靈敏度，須在單位質(zhì)量分辨率下

（2）分辨率，須指明在哪個(gè)具體的質(zhì)量處

（3）單位質(zhì)量分辨下的m/z范圍

一、關(guān)于m/z范圍

須是單位質(zhì)量分辨以內(nèi)的m/z范圍（m/z范圍跟質(zhì)量分析器有關(guān)）

1、四極桿型

四極桿擅長(zhǎng)做什么呢？就是定量！m/z范圍大約在3000～4000 amu，但同時(shí)，四極桿對(duì)大質(zhì)量數(shù)有歧視，所以，過(guò)分強(qiáng)調(diào)m/z范圍沒(méi)有特別意義，因?yàn)檫@不是四極桿的擅長(zhǎng)。

2、離子阱型

大約在4000（單位質(zhì)量分辨下），有些公司說(shuō)到6,000，甚至說(shuō)到20,000 amu，其實(shí)也是瞎掰，因?yàn)檫@時(shí)分辨率差，m/z 500 和503 都分不開(kāi)。

離子阱普遍對(duì)小質(zhì)量有歧視（1/3效應(yīng)），但對(duì)大質(zhì)量（比如1000 amu以上的）反而比四極桿的響應(yīng)好。

3、飛行時(shí)間TOF

這是它的強(qiáng)項(xiàng)！單獨(dú)的TOF做個(gè)十幾萬(wàn)沒(méi)什么問(wèn)題，但在串聯(lián)了前端的四極桿、離子阱后，二級(jí)質(zhì)譜（MS/MS）的m/z范圍就會(huì)受到四極桿、離子阱的限制。但如果一定要測(cè)定大分子，TOF（或者串聯(lián)TOF）還是遲早要買一臺(tái)的。

單從液質(zhì)聯(lián)用來(lái)說(shuō)，能做串聯(lián)質(zhì)譜（tandam mass）是非常重要的，因?yàn)橐嘿|(zhì)的背景干擾比氣質(zhì)大得多，串聯(lián)質(zhì)譜就是要去除背景。作為前端的質(zhì)量選擇器，大部分都采用四極桿或者離子阱，所以，現(xiàn)在看來(lái)，對(duì)于液質(zhì)聯(lián)用，m/z范圍就不是一個(gè)特別重要的指標(biāo)。如AB 5500 Qtrap，m/z上限僅做到1000 amu。因?yàn)檫@類儀器，夠用了。

二、分辨率

分辨率好像總是個(gè)永遠(yuǎn)討論不清的話題。

可參見(jiàn)：有機(jī)質(zhì)譜的分辨率

談?wù)動(dòng)袡C(jī)質(zhì)譜的分辨率

需要強(qiáng)調(diào)的是：

1）對(duì)于磁質(zhì)譜，我們?nèi)绻f(shuō)分辨率為10000，比常規(guī)有機(jī)質(zhì)譜10000的分辨率，要好很多很多。

2）對(duì)于四極桿、離子阱，分辨率用10000表示是不科學(xué)的，因?yàn)樗傇谧?，所以用FWHM或R=nM表示比較好，因?yàn)樗诨緈/z范圍內(nèi)是不變的?；蛘?，說(shuō)明是在哪個(gè)質(zhì)量數(shù)下測(cè)定的，比如在500 m/z時(shí)，分辨率優(yōu)于5000。

3）對(duì)于TOF/FT/Orbitrap等，須指明在哪個(gè)質(zhì)量數(shù)下面測(cè)定的，也用10000、20000 之類的數(shù)字來(lái)表示。

三、談掃描速度有沒(méi)有用？

掃描速度不是非常重要的一個(gè)指標(biāo)。因?yàn)閷?shí)際獲得一種譜圖，我們考慮的是duty cycle的時(shí)間，也就是采集一張譜圖需要多少時(shí)間。所以，考察儀器“快"、“慢" 的主要衡量標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)該是duty cycle時(shí)間，而不是掃描速度。

掃描速度指的是：把規(guī)定m/z范圍內(nèi)的離子一個(gè)一個(gè)“掃描"出質(zhì)量分析器的能力，表示為：amu/sec。這僅僅指從分析器出來(lái)的一段時(shí)間，質(zhì)量分析器不同、工作模式不同，差別就很大。

1、四極桿：

duty cycle時(shí)間＝掃描時(shí)間＋掃描之間的間隔時(shí)間

對(duì)于全掃描，比如 掃描m/z 50～550 amu，掃描速度1000 amu/sec，可知道掃描時(shí)間為：

500/1000＝0.5秒＝500 毫秒，間隔時(shí)間為幾個(gè)毫秒，所以，大約每秒可以采集2張全掃描譜圖

對(duì)于SIM，比如掃描 m/z 499.5～500.5 amu，掃描速度1000 amu/sec，可知道掃描時(shí)間為：

1/1000=0.001秒。間隔時(shí)間就比較重要了，為幾個(gè)毫秒，所以，用SIM，每秒可采集幾百?gòu)堊V圖

2、三重四極桿

參見(jiàn)：三重四極桿的掃描速度和譜圖采集速率

3、離子阱

參見(jiàn)：為什么離子阱質(zhì)譜的采集速度不由掃描速度決定？

4、TOF

TOF是非?？斓馁|(zhì)量分析器，如果只求快，不要求分辨率，可以快到每秒采集幾萬(wàn)張全掃描譜圖。

如果還要求高分辨率，可以每秒采集1～20張全掃描譜圖

就我看來(lái)，大家談到TOF，是比較注重用正確的duty cycle時(shí)間來(lái)表達(dá)儀器快、慢的，這是對(duì)的。

其它在討論四極桿、離子阱時(shí)都不注重

談到四極桿，對(duì)定性倒還無(wú)所謂，因?yàn)檗D(zhuǎn)換時(shí)間一般都在幾個(gè)毫秒量級(jí)，比如這兩年，儀器公司已經(jīng)把轉(zhuǎn)換時(shí)間從20個(gè)毫秒，提高到1毫秒的水平。

但對(duì)定量，用duty cycle表示，要科學(xué)得多，因?yàn)樵诙繒r(shí)，分析器的掃描速度用的時(shí)間已經(jīng)不是決定duty cycle的時(shí)間，MRM通道間的轉(zhuǎn)換時(shí)間，已經(jīng)變成了決定時(shí)間。

比如：在MRM單位分辨下（即掃描質(zhì)量范圍為1 amu），掃描速度是1000 amu/sec，掃描時(shí)間是1/1000＝1 毫秒，如果MRM通道轉(zhuǎn)換時(shí)間是20毫秒，那么每秒可采集的譜圖數(shù)是：1000/21=47.6張；

如果MRM通道轉(zhuǎn)換時(shí)間是1毫秒，那么每秒可采集的譜圖數(shù)是：1000/2＝500張

將會(huì)有數(shù)量級(jí)的巨大提升。

再比如談到離子阱，上面引用的講得明白，離子阱duty cycle時(shí)間，掃描速度關(guān)系很小，主要是注入離子、穩(wěn)定到阱中的時(shí)間。

對(duì)離子阱，談掃描速度有多大，沒(méi)有啥意思；倒是談?wù)劙褣呙杷俣冉档?，分辨率能到達(dá)多高有意思。因?yàn)樵陔x子阱里，掃描速度一放慢，分辨率就可以大幅提高，甚至可以分辨0.05 amu的質(zhì)量；

離子阱所謂27,000 amu/sec（或60,000 amu/sec）的掃描速度，不僅對(duì)duty cycle 沒(méi)什么貢獻(xiàn)，而且沒(méi)有人會(huì)這么做，因?yàn)檫@時(shí)的分辨率差到了3～5個(gè) amu。

四、關(guān)于靈敏度

QUOTE:

靈敏度說(shuō)“利血平 10pg S/N> 500（RMS） "  中10pg，是說(shuō)的質(zhì)量么，怎么靈敏度不用濃度來(lái)衡量的么。

靈敏度是用信噪比來(lái)表示的，S/N，信噪比的計(jì)算又有峰-峰比和RMS之分（RMS計(jì)算的信噪比一般要比峰-峰比計(jì)算的高5～10倍）

RMS是在待測(cè)峰周圍，找一段質(zhì)量范圍，然后做均方根平均，作為噪音高度（強(qiáng)度）。再拿待測(cè)峰的高度除以平均高度，即為RMS。

我自己想來(lái)，儀器廠家一般都傾向于用RMS來(lái)表示，因?yàn)轵?yàn)收時(shí)各家實(shí)驗(yàn)室的氣體、水、溶劑都不是很確定，所以，用RMS更合理些，可以盡可能地平均掉（消除掉）這種差別。

而峰-峰比，是尋找待測(cè)峰周圍一個(gè)高的噪音峰，拿待測(cè)峰的高度去比上強(qiáng)的那個(gè)噪音峰。可能藥物殘留檢測(cè)時(shí)要求如何判定時(shí)會(huì)用到（o（∩_∩）o…，因?yàn)檫@是法規(guī)判定啊，要排除掉任何一種假象）。儀器驗(yàn)收時(shí)，不會(huì)做這事，因?yàn)榧词棺?，也是一針好一針壞，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果都不一樣。

質(zhì)譜的一大特色，就是它是一個(gè)質(zhì)量檢測(cè)器，峰面積跟質(zhì)量成正比（記得好像UV紫外是濃度型檢測(cè)器）。也就是說(shuō)，我拿1 pg/uL，進(jìn)樣10 uL；跟拿5 pg/uL，進(jìn)樣2 uL相比，如果其它條件都一樣，峰面積應(yīng)該是一樣的。

我個(gè)人的感覺(jué)，從實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō)，稀釋樣品可能比較容易，很容易比較準(zhǔn)確；而進(jìn)樣器的定量環(huán)一般為20 uL，所以進(jìn)樣10 uL，一定比進(jìn)樣2 uL來(lái)得準(zhǔn)確一些。

五、看掃描功能時(shí)，主要是：

（1）如果是同一類型儀器，可以幾家不同的廠家比，看差別；看這個(gè)差別是不是真的差別（還是只是各個(gè)廠家的叫法不同）。

看看這個(gè)差別對(duì)自己現(xiàn)在和將來(lái)的工作是不是有用？有用就再看看，沒(méi)用就可以忽略不計(jì)。

（2）有些指標(biāo)是相互沖突的，不同的分析器適用的工作范圍也是不同的。

只是就目前趨勢(shì)來(lái)講，據(jù)說(shuō)國(guó)際上正在流行一種同時(shí)滿足幾項(xiàng)高指標(biāo)，一次實(shí)驗(yàn)多做幾種掃描的觀點(diǎn)，比如：一次實(shí)驗(yàn)同時(shí)定性定量，在高速度時(shí)還可以高分辨等等。