液相色譜主要用于對吸收紫外線(xiàn)的液態(tài)有機物(不飽和有機物)進(jìn)行定性、定量分析和純度分析,定性,是保留時(shí)間的特征峰值。沒(méi)有辦法分析物質(zhì)結構,但如果已知的物質(zhì)是x,則要測量的物質(zhì)可以與x標準物質(zhì)比較。液相色譜測定表明,該物質(zhì)的停留時(shí)間相同,測定結果表明,該物質(zhì)主要用于測試中的色譜鑒定。
液相色譜儀定量,即濃度與峰值面積成正比。要測量的材料的純度是根據標準產(chǎn)品的標準曲線(xiàn)計算的。主要用于內容的確定。純度分析,這是以波長(cháng)為基礎的。物質(zhì)的純度大致由樣品在特定波長(cháng)注入時(shí)主成分色譜和雜質(zhì)色譜的峰值面積決定,主要用于測定相關(guān)物質(zhì)。
高效液相色譜進(jìn)樣的濃度沒(méi)有確切的濃度因為濃度是由許多因素決定的不是的。
液相色譜的濃度與以下因素有關(guān):
1.探測器探測能力。紫外、蒸發(fā)、差示和熒光探測器的探測能力不同。其中,紫外探測器的靈敏度、光源能量、循環(huán)電池的通透性和清潔度都決定了紫外探測器的檢測能力。液相色譜儀
2.物質(zhì)響應值。同一檢測器下檢測到的不同物質(zhì)的信號大小不同。同一濃度為1mg/ml,a、b物質(zhì)的響應值可相差2倍、10倍甚至100倍。
3.液相色譜HPLC中紫外檢測波長(cháng)同一物質(zhì)在不同紫外波長(cháng)下的響應值不同這與該物質(zhì)在該波長(cháng)下的吸收值有關(guān).
4.高效色譜柱的載量,有時(shí)物質(zhì)濃度過(guò)高超過(guò)色譜柱的負荷范圍,會(huì )形成“平頭峰”或峰分叉,肩峰,對稱(chēng)性差等分離問(wèn)題。
5.液相色譜儀按方法驗證事實(shí)上,應用于常規測試方法的zui高濃度應通過(guò)一系列方法學(xué)驗證來(lái)驗證,以證明濃度的合理性和可行性方法學(xué)驗證中zui高濃度主要需要通過(guò)線(xiàn)性試驗、回收率試驗、重復性試驗、專(zhuān)屬性試驗和系統適用性試驗。