液相色譜儀的日常維護保養

做好 液相色譜儀的日常維護保養 ，養成良好的使用習慣，能大大地降低故障率，減少停機和降低維修成本。我們從液相色譜儀的高壓泵、進(jìn)樣器、檢測器這幾個(gè)主要結構，來(lái)探討在日常使用中需要注意的事項。

高壓泵的保養

泵是液相色譜的核心，泵將流動(dòng)相從溶劑瓶輸送到液相流路系統中，并要在高壓下保持流量和壓力的穩定。狀態(tài)正常的高壓泵是液相色譜準確分析的基礎，所以平日一定要重視對泵的維護。

1. 泵壓力波動(dòng)

很多情況下，泵的問(wèn)題反映在壓力上，壓力波動(dòng)又是常見(jiàn)的一類(lèi)問(wèn)題。泵正常的壓力波動(dòng)通常會(huì )在2%以?xún)?，且平穩規律；不正常的波動(dòng)通常由氣泡和鹽造成。如果流動(dòng)相中的氣泡沒(méi)有被脫氣機除掉而到了泵以后，就會(huì )造成壓力波動(dòng)，通常我們可以通過(guò)重新清洗（purge）流路和再次脫氣流動(dòng)相加以解決。

由鹽造成的波動(dòng)主要是因為流動(dòng)相中加入了濃度較高的緩沖鹽，在含鹽流動(dòng)相與有機相混合的時(shí)候，鹽會(huì )有微小的析出，從而導致壓力異常波動(dòng)，解決這類(lèi)問(wèn)題可以考慮適當降低鹽的濃度，或者使用甲醇取代乙腈有機相。如果一定要用到此類(lèi)流動(dòng)相，可以考慮在有機相中加入一定比例的水，然后適當提高梯度結束的終點(diǎn)。

2. 過(guò)濾白頭保養

在泵的維護里還有一項常做的工作就是更換清洗閥上的過(guò)濾白頭，通常判斷的標準是純水以5mL/min流速清洗的時(shí)候，如果壓力超過(guò)1MPa則考慮更換。根據更換下來(lái)的過(guò)濾白頭，可以大致判斷儀器的使用狀況。如果白頭是白色的且不臟，但是堵，那有可能是流動(dòng)相中有鹽析出造成的；如果白頭是灰黑色的，這是常見(jiàn)的狀況，是由于泵頭密封墊磨損造成的；如果白頭是黃色、綠色等怪異的顏色，儀器污染較嚴重，可能是流動(dòng)相里的微生物造成的。

除此之外，在泵的使用過(guò)程中，常常會(huì )遇到更換流動(dòng)相的情況，這種更換是指從反相溶劑更換到正相溶劑或者反過(guò)來(lái)的過(guò)程。這個(gè)過(guò)程要考慮流動(dòng)相的兼容性，常用的正反相色譜溶劑是不互溶的，所以在更換期間，一定要用異丙醇沖洗系統，保證管路里所有的原有溶劑都被異丙醇替換掉后再更換流動(dòng)相。

進(jìn)樣器的保養

進(jìn)樣器分手動(dòng)和自動(dòng)兩大類(lèi)，雖然兩者工作模式不同，但使用的要點(diǎn)是基本一致的。

1. 防止交叉污染

自動(dòng)進(jìn)樣器常見(jiàn)的問(wèn)題是交叉污染，交叉污染產(chǎn)生的原因很直接，樣品殘留在進(jìn)樣針內外表面，并隨下一次進(jìn)樣進(jìn)入色譜系統。要解決交叉污染，主要靠清洗。自動(dòng)進(jìn)樣器都會(huì )有洗針的功能，如果樣品濃度較高或者是吸附性比較強，一定要打開(kāi)此功能；如果未打開(kāi)洗針功能，污染可能已經(jīng)殘留在了針座或流通閥上，那么這兩個(gè)部件需及時(shí)超聲清洗。

出現在自動(dòng)進(jìn)樣器上的另外一個(gè)問(wèn)題是峰面積重現性差，考慮可能與自動(dòng)進(jìn)樣器吸取樣品有關(guān)。首先觀(guān)察樣品的液面是不是足夠高，以保證進(jìn)樣器可以吸到樣品。排除這個(gè)問(wèn)題后，再察看自動(dòng)進(jìn)樣器的設置，對于一些粘度大的樣品，要降低自動(dòng)進(jìn)樣器的吸取速度。

2. 精細操作

手動(dòng)進(jìn)樣器的操作要點(diǎn)大致相同，應使用液相色譜儀平頭進(jìn)樣針，進(jìn)樣時(shí)插針應插到底，不使用時(shí)將針頭留在進(jìn)樣器內，使用前后都要及時(shí)清洗。

檢測器的保養

目前市場(chǎng)上檢測器的種類(lèi)繁多，而且各有特性。以常用的紫外（VWD）/二極管陣列（DAD）檢測器來(lái)說(shuō)，這兩類(lèi)都是紫外類(lèi)的檢測器，雖然光路設計不同，但是本質(zhì)原理都是相同的。

1. 光源部分

檢測器中非常重要的部件是光源，光源對發(fā)射能量有要求，一旦能量衰減到一定程度，就會(huì )出現基線(xiàn)噪聲變大，靈敏度降低等一系列影響使用的問(wèn)題，因此光源是一個(gè)消耗品。通常紫外燈的壽命是2000h，當到達這個(gè)時(shí)限的時(shí)候，我們就要特別關(guān)注燈的能量狀況，可以通過(guò)儀器維護軟件中自帶的“燈能量測試”功能來(lái)判斷，測試的結果會(huì )分別評估低、中、高三個(gè)波長(cháng)段的能量，一旦某個(gè)波長(cháng)段的測試結果顯示失敗，就表示需要更換燈。

2. 檢測池

檢測器中另一個(gè)重要部件是檢測池，也叫流通池。通常大家關(guān)心的一個(gè)問(wèn)題是檢測池被堵掉，因為檢測池通常不是很耐壓，所以一旦被堵就很可能造成損壞。事實(shí)上檢測池通常不太容易被堵，原因是幾乎所有的顆粒雜質(zhì)都會(huì )被色譜柱攔下了，所以堵塞檢測器的東西基本都不是來(lái)自樣品的，很可能是后來(lái)“產(chǎn)生”的，比如含鹽流動(dòng)相殘留在檢測池中導致鹽析出。

液相色譜儀是一種高精密儀器，在日常使用中的維護保養工作細致謹慎，需要每一位使用者在實(shí)踐中不斷地摸索。